اختبار موليش Molish Test
نظرية التجربة
- اختبار موليش Molish Test وهو تفاعل عام يجري على للكشف على جميع السكريات.
- يحلل حمض الكبريتيك المركز H2SO4 المركز (عامل مجفف dehydrating agent وليس عامل مؤكسد) الروابط الكلايكوسيدية ليعطي سكريات احادية تفقد بدورها (3 جزيئات من الماء) لتعطي ال Furfural ومشتقه اللذين يتحدان بدورهما (تكثف) مع ألفا نافثول الكحولية وظهور المعقد البنفسجي على شكل حلقة.
- المعادلات التالية توضح ماسبق فى حالة كان السكر هو جلوكوز وبنفس الطريقة فى حالة السكريات الأخري
خطوات التجربة لاختبار موليش
- يطبق اختبار موليش كما يلي:
(1) يوضع في أنبوب اختبار (من 2 إلى 3) مل من المحلول السكري (جلوكوز مثلاً).
(2) يضاف إليه من (3) إلى (4) قطرات من محلول الفا - نافتول ( α - نافتول) ويمزج المحلولان مزجاً جيداً .
(3) ثم يسكب بحذر شديد بواسطة ممص حوالي 2 مل من حمض الكبريتيك المركز بحيث يسيل على جدار الأنبوب.
- لاحظ تشكل حلقة بنفسجية حمراء اللون ، عند سطح السائلين أو في وسط السائل المزيج .
(4) خض السائل ولاحظ عندئذ انتشار اللون البنفسجي المحمر في السائل كله.
- هذا دليل على إيجابية التفاعل أما إذا لم تتشكل الحلقة ولم يظهر اللون البنفسجي المحمر في السائل عند خض المزيج فهذا يعني أن الاختبار سلبي ودل ذلك على عدم وجود المادة السكرية، لذلك يستعمل هذا التفاعل للتعرف والتشخيص على جميع السكريات تعرفاً عاماً.
طريقة تحضير كاشف كوليش Molish reagent
يتم تحضير كاشف موليش بواسطة الكيمياويات التالية:
- ألفا - نافتول 14,5 جم.
- كحول الإيثانول (سبيرتو) 1000 مل تقريباً.
- يذاب 14,5 جم من ألفا - نافتول في كمية من السبيرتو ثم يكمل الحجم النهائي بوساطة السبيرتو إلى الليتر.
- حيث إنه يعطي مع السكريات وبوجود حمض الكبريتيك لون أحمر بنفسجي.